Practica+de+Factores+Fisicos+y+Quimicos+en+Bacterias PRACTICA 7

Laboratorio de Microbiología General EFECTO DE FACTORES Físicos Y QUIMICOS SOBRE LAS BACTERIAS OBJETIVO Conocer algunos efectos del medio ambiente sobre el desarrollo de las bacterias INFORMACION GENERAL Las bacterias están casi por completo a merced de su medio ambiente Como sabemos, algunos microorganismos poseen mecanismos limitados para regular el pH de su alrededor y algunos otros móviles pueden rechazar sustancias nocivas o bien pueden ser atraídos por mecanismos quimiotácticos a una fuente de alimentos Otro factor es la temperatura de un medio de cultivo ya que rige los índices de velocidad de crecimiento, multiplicación y muerte de los microorganismos Con las radiaciones directas en los cultivos se ha encontrado que tienen dos efectos en los microorganismos El primero de ellos es la muerte y el otro es la producción de mutantes en la población superviviente Las vibraciones sonoras o supersónicas alteran notablemente las células causando rotura de la pared celular y su desintegración total Otro factor importante es la presión osmótica, que en el caso de las bacterias es mayor que en los medios de cultivo, por contener concentraciones mayores de sales, aminoácidos y numerosos compuestos orgánicos e inorgánicos; esto crea una tendencia a la entrada de agua al protoplasma por osmosis a través de la membrana citoplasmática semipermeable En condiciones normales de cultivo, las células mantienen un estado de turgencia PROCEDIMIENTO I Efecto de la temperatura Material: Tubos con caldo nutritivo, cultivos de bacterias Técnica: a) Inocule cuatro tubos con caldo nutriente (dos asadas) b) Numérelos del I al IV e incúbelos a las siguientes temperaturas, durante 2448 horas TUBO I Refrigerador 4°C TUBO II Temp Lab TUBO III 37°C TUBO IV 55°C c) Observe crecimiento y anote resultados de acuerdo al siguiente sistema 0 no crecimiento + crecimiento pobre ++ buen crecimiento +++ crecimiento excelente II Punto término mortal Material: Termómetro, baño maría, cajas de petri con Agar nutritivo, cultivos en caldo de 24 horas Técnica: a) Haga frotis con cada uno de los cultivos que se le proporcionen y tíñalos al Gram para determinar su pureza b) Marque sus cajas con cada una de las temperaturas que se indicarán c) Caliente el agua del baño maría a una temperatura de 45°C d) Después de sembrar una caja de Agar nutritivo que servirá de control, coloque sus tubos de cultivo en baño maría y déjelos ahí durante 11 minutos e) Al final de este período, siembre en cajas de petri (después de enfriados los cultivos) f) Eleve ahora la temperatura del agua del baño maría a 70°C y repita la operación g) Incube invirtiendo las cajas a 37°C durante 48 horas y anote los resultados obtenidos III Efecto de rayos ultravioleta Material: Cajas de petri con Agar nutritivo, cultivos de bacterias Técnica: a) Inocule sus cajas con Agar nutritivo con los microorganismos proporcionados (inoculando por toda el área de la caja) b) Coloque un papel negro que cubra la mitad de la caja (quita previamente las tapas) c) Exponga las cajas a la acción directa de los rayos ultravioleta durante 5 minutos, tape la caja de petri e inviértala d) Incube a 37°C durante 48 horas y anote los resultados IV Efecto de la presión osmótica Material: Tubos con caldo nutritivo con las siguientes concentraciones de NaCl (5%, 10%, 20%, 40%), cultivos bacterianos Técnica: - Inocule sus tubos con los microorganismos proporcionados - Incube durante 5 días a 37°C - Observar cada 24 horas - Hacer frotis y teñir al Gram al quinto día CUESTIONARIO 1 En base a la temperatura, ¿Cómo se clasifican los microorganismos? 2 ¿Qué entiende por temperatura óptima de crecimiento? 3 ¿Cuál es la respuesta de los microorganismos a temperatura bajo cero? 4 ¿Qué es el pH? 5 ¿Cuál es el efecto del pH en los microorganismos? 6 ¿En qué forma alteran las radiaciones a los microorganismos? 7 ¿Qué es un microorganismo halófilo? 8 Citar algunas clases de radiaciones microbicidas REPORTE PRACTICA Nº 9 EFECTO DEL MEDIO SOBRE LAS BACTERIAS FECHA EN QUE SE REALIZO LA PRACTICA MODIFICACIONES A LA PRACTICA RESULTADOS OBTENIDOS DISCUSION DE RESULTADOS CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES